9001-63-2
中文名称
溶菌酶
英文名称
LYSOZYME
CAS
9001-63-2
分子式
C11H20NO6-
分子量
262.28
MOL 文件
9001-63-2.mol
更新日期
2024/05/14 10:35:06
9001-63-2 结构式
基本信息
中文别名
胞壁质酶溶菌酶素
球蛋白G
溶菌酶 现货供应
N-乙酰胞壁质聚糖水解酶
溶菌酶 来源于人类中性粒细胞
英文别名
LYSOZYMglobuling
lysozymeg
Antalzyme
delvozyme
MURAMIDASE
globuling1
Aids072619
Lysozyme c
Lydium-KLP
所属类别
生物化学品: 酶类: 治疗用酶物理化学性质
外观性状原料处理取新鲜鸡蛋清中得到的一种能分解粘多糖的酶制品，为白色或微白色的结晶性或我定型粉末，无臭，味甜。易溶于水，不溶于丙酮、乙醚。在酸性溶液中十分稳定，水溶液遇碱易被破坏。最适Ph为6.6，等电点pI=10.5～11。耐热至550时活性不被破坏。溶菌酶为一种碱性蛋白质。常与氯离子结合成为溶菌酶氯化物。
储存条件2-8°C
溶解度溶于二甲基亚砜
形态powder
颜色white
Merck13,5660
序列H-Arg-Val-Val-Arg-Asp-Pro-Gln-Gly-Ile-Arg-Ala-Trp-Val-Ala-Trp-Arg-Asn-Arg-OH
稳定性稳定的。与强氧化剂不相容。
EPA化学物质信息Lysozyme (9001-63-2)
制备方法
方法1
原料处理取新鲜或冰冻蛋清70kg，使pH在8左右，解冻过筛，除去蛋清中的脐带、蛋壳碎片及其他杂质。使温度降到50左右（不得超过100），边搅拌加加入724树脂10kg（湿重），待树脂全部悬浮在蛋清中，保持在0～50，搅拌吸附5h，再将蛋清移入冷库0～50，静置过夜。蛋清724树脂；30C→吸附树脂吸附物
去杂蛋白、洗脱、沉淀把上层清液倾出，用清水洗去树脂表面附着的蛋白质，反复慢慢清洗4次，以防止树指流失。将树脂抽滤除去水分。分3次将24L、pH6.5的磷酸（0.15mol/L）缓冲溶液加在树脂中，每次加完后搅拌约15min，搅拌后减压抽滤除去水分。再将18L硫酸铵（100g/L即10%），分4次洗脱溶菌酶，每次加完后搅拌0.5h，过滤抽干。合并洗脱液，在每升洗脱液中加入320g固体硫酸铵，使含量达到400g/L(40%)，此时有白色沉淀产生，冷处静置过夜，次日虹吸上清液，沉淀离心分离，得粗品。
树脂吸附物H2O；磷酸缓冲液→去杂蛋白吸附物(NH4)^2^）SO4→洗脱液(NH4)2SO4→沉淀粗品
透析将粗品加入1.5kg蒸馏水，使之完全溶解，将入透析袋，冷库中透析24～36h，除去大部分硫酸铵，得透析液。
粗品蒸馏水；溶解→透析透析液
盐析将澄清透析液，在不断搅拌下慢慢滴加氢氧化钠（1mol/L）,中和掉过量酸，使pH达8.5～9时，如有沉淀生成，应立即离心除去、然后在不断搅拌下加盐酸（3mol/L），使溶液pH达到3.5，按体积每100ml酸性透析液缓缓加入固体氯化钠5g，即有白色沉淀析出，在0～50冷库放置2d，离心或过滤得溶菌酶沉淀 。
透析液^…
干燥在不断搅拌，按照溶菌酶沉淀的质量加入10倍于该量的冷却至00C的无水丙酮，待颗粒权细，在冷处放置数小时，滤去丙酮，沉淀用真空干燥，直到无丙酮臭味为止，即得口服或外用溶菌酶原料。
湿溶菌酶丙酮；00C→干燥溶菌酶
制剂取干燥粉碎砂糖粉，每千克该糖粉中加入50g的滑石粉（即得5%），通过129目筛，加淀粉浆（50g/L 即5%）适量，在混合机内搅拌均匀，制成软材，过12目筛，700C烘干，用14目筛整颗，水分应以控制在2%～4%左右。加入一定量溶菌酶粉混合，加1%硬脂酸酶，过16目筛2次，压片，即得溶菌酶口含片，每片含溶菌酶20mg。
溶菌酶压片→制剂口含片
方法2
从蛋清中提取制得。1.原料处理 新鲜或冰冻蛋清（或蛋壳水）70kg，用试纸测其pH值，应在8.0左右，经解冻后通过铅筛，除去蛋清中的脐带、蛋壳碎片及其他杂质。2.吸附 用冰水冷却并搅拌蛋清，使温度降到5℃，缓缓加入724树脂10kg，搅拌，使树脂完全悬浮在蛋清中。保持温度0-10℃，再继续搅拌5h。将蛋清移入冷库，在0-10℃静置过液。3.洗涤、洗脱 隔天把上层蛋清清液倾出，下层用清水洗去附着的蛋白质，先后共洗四次。最后将树脂抽滤去水分，用24kg0.15M磷酸缓冲液（pH6.5）分三次加入树脂搅拌，每次搅拌15min后抽滤去水分。然后用10%硫酸铵18kg，分4次洗脱溶菌酶。合并洗脱液，加入32%（重量/体积）固体硫酸铵使含量达40%，析出白色沉淀。在冷处放置过夜，过滤出沉淀。4.透析 将沉淀溶解于1.5L蒸馏水中，在冷库内透析24-36h，除去大部分硫酸铵。5.盐析 透析完毕，将溶液用滤纸过滤，得澄清透析液。用滴管慢慢加入氢氧化钠溶液，使pH上升到8.5-9.0，如有白色沉淀，应即离心除去。然后在搅拌下加入3N盐酸，使溶液pH为3.5。按体积缓缓加入5%固体氯化钠，生成白色沉淀。在0-10℃冷库放置48h，抽滤得到溶菌酶沉淀。6.干燥沉淀内加入10倍量0℃无水丙酮，搅拌使颗粒松细，在冷处静置数小时，滤去丙酮。沉淀用五氧化二磷真空干燥，即得口服或外用溶菌酶粉剂原料。如不用丙酮脱水，可将溶菌酶透析液冷冻干燥可得不含氯化钠的溶菌酶成品。按蛋清重量计，收率0.1%。