概述[1]
蜀黍苷的化学名P-羟基-(S)-苯乙醇硝酰-β-D-糖苷，为存在于高梁(Sorghum)中的氰糖苷，可通过酪氨酸生成，贮藏于叶表皮细胞中。分解时可产生氰化氢和P-羟基苯醛。催化此反应的有两种酶，即β-糖苷酶可对(1)水解，羟基苯乙醇硝酰裂解酶可催化(2)分解，主要都含于叶肉细胞中。在叶组织被破坏时，产生氰化氢的机制在于因破坏而由分解酶催化的分解。
检测方法[1]
方法1：澳洲坚果各部位蜀黍苷含量的测定。以苦杏仁苷为内标物质，采用高效液相色谱法，DiamonsilC18(150mm×4.6mm，5μm)色谱柱，柱温35℃，自动进样器进样量5μL，总流速1.0mL/min，乙腈(A)－0.1%甲酸水溶液(B)为流动相，使用蒸发光散射检测器(ELSD)进行检测。结果表明:蜀黍苷和苦杏仁苷标准品的浓度比(X)与对应的峰面积比(Y)所作标准曲线方程为Y=0.465389X2+0.349685X－0.000520968，决定系数Ｒ2=0.9977，ＲSD为2.60%。方法的平均回收率为97.93%±2.35%，ＲSD为2.39%。对澳洲坚果各部位蜀黍苷含量进行测定发现，澳洲坚果花中蜀黍苷含量最高，达(49.92±0.96)mg/g，叶次之，果仁中蜀黍苷含量最低，仅为(0.64±0.01)mg/g。且不同品种青皮中蜀黍苷含量亦不同。HPLC－ELSD内标法测定蜀黍苷快速简便，准确度高，重复性好，成本较低，测定结果可靠。澳洲坚果花、叶中蜀黍苷含量较高，使用时应适当考虑脱除其中的蜀黍苷。澳洲坚果仁中仅含微量蜀黍苷，在安全使用范围之内。
方法2：一种快速检测白酒酿酒原料高粱中蜀黍苷的方法，其步骤为：
（1）通过XevoTQ串联四极杆液相质谱仪（WatersXevoTQMS，沃特世科技上海有限公司）检测蜀黍苷标准品来确定其特征离子并建立LC–MS/MS–MRM：
a、用甲醇配制200mg/L的蜀黍苷标准品储备液作为最高浓度，用甲醇将其稀释至20mg/L作为蜀黍苷标准使用液；取1mL蜀黍苷标准使用液用微孔滤膜过滤处理后放入2mL样品瓶待进样检测；
b、使用XevoTQ串联四极杆液相质谱仪来检测蜀黍苷标准溶液，液相条件：流动相A：0.1%甲酸-水；流动相B：乙腈；流速0.3mL/min；洗脱梯度：流动相B4min由5%线性增加至40%，再1min由40%线性增加至100%，持续1min，再1min由100%线性减少至5%；色谱柱：WatersAcquityC18column，50mm×2.1mm×1.7μm；进样量2μL；ESI离子源；正离子模式；毛细管电压2.7kV，锥孔电压20V，碰撞能量12V；源温度120℃，去溶剂温度300℃；去溶剂气体流速700L/h，锥孔气体流速50L/h，碰撞气体流速0.15mL/min；
c、根据检测结果，蜀黍苷母离子为m/z329，特征子离子为m/z180及m/z132，建立LC–MS/MS–MRM方法，选择m/z329-180及m/z329-132作为定性离子对，m/z329-132作为定量离子对；
（2）LC–MS/MS–MRM方法对白酒酿酒原料高粱中的蜀黍苷定性检测：取5g磨碎之后的高粱放置于烧杯中，加入20mL甲醇，超声波萃取30min后过夜保存，次日取萃取液置于50mL离心管12000rpm离心30min取上清过滤，加入体积比1:1的超纯水，使用旋蒸仪蒸发去除20mL甲醇后取1mL待进样检测；
（3）制作蜀黍苷定量标准曲线对白酒酿酒原料高粱中的蜀黍苷进行准确定量：
d、标准曲线制作：将20mg/L蜀黍苷标准使用液梯度稀释成一系列蜀黍苷标准使用液，以峰面积为横坐标，浓度为纵坐标绘制标准曲线；
e、白酒酿酒原料高粱预处理：取5g磨碎后的高粱于烧杯中，加入20mL甲醇，超声波萃取30min后过夜，次日将萃取液置于50mL离心管12000rpm离心30min，取上清过滤后加入体积比1:1的超纯水，使用旋蒸仪蒸发去除20mL甲醇后取1mL待进样；
f、白酒酿酒原料高粱中蜀黍苷的定量分析：使用LC–MS/MS–MRM方法检测样品，使用标准曲线进行定量。
主要参考资料
[1] 澳洲坚果各部位蜀黍苷含量的测定
[2] CN201510308706.9一种快速检测白酒酿酒原料高粱中蜀黍苷的方法