A673
A673 性质
| 储存条件 | -196°C |
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将含有1mL人胚肺成纤维细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查A673细胞密度。
如果A673细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于人A673细胞，传代可参考以下方法：
1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗A673细胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2ml完全培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。
4.将A673细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
1）准备MEM培养基；北美胎牛血清，10%；PS 1%。
2）A673细胞培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）A673细胞冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。