溶菌酶

原料处理取新鲜鸡蛋清中得到的一种能分解粘多糖的酶制品，为白色或微白色的结晶性或我定型粉末，无臭，味甜。易溶于水，不溶于丙酮、乙醚。在酸性溶液中十分稳定，水溶液遇碱易被破坏。最适Ph为6.6，等电点pI=10.5～11。耐热至55⁰时活性不被破坏。溶菌酶为一种碱性蛋白质。常与氯离子结合成为溶菌酶氯化物。外观:白色粉末
纯度(HPLC) ≥98.0%
醋酸根含量≤12.0%
水分含量≤8.0%
肽含量≥80.0%
内毒素≤50EU/mg
氨基酸组成分析≤±10%为酶类药，能参与粘多糖代谢溶菌酶可参与粘多糖代谢，它能催化革兰氏阳性菌细胞不溶性多糖水解生成可溶性粘肽，是一种具有杀菌作用的天然感染物质，有抗菌、抗病毒、止血、消肿、镇痛及加快组织修复等功能。常用于急性咽喉炎，副鼻窦炎，口腔溃疡，扁平苔癣，亦用于慢性鼻炎，慢性咽喉炎及扁平疣等的治疗。但是，用药溃偶有恶心、呕吐、头痛、瘙痒感、眩晕、关节痛、腹泻、食欲不振和皮疹等，罕有过敏性休克。鸡蛋白过敏者忌用。
溶菌酶含片：口服，一次20mg,一日4～6次。
溶菌酶肠溶片：带状疱疹和扁平疣，口服，每次50～100mg,每日3次。外用每次30～50mg，每日3次。主要用于五管科多种粘膜疾患，如副鼻窦炎、慢性鼻炎、咽喉炎、扁平苔癣、口腔溃疡、渗出性中耳炎等徉患，亦用于皮肤科带状包疹，扁平疣及铬性鼻炎。溶菌酶是一种低分子量的，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。溶菌酶为正常机体免疫防御机制的组成部分，因具有溶解细菌细胞壁的作用而得名，是能溶解某些细菌的一种糖水解酶。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4 糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。在人体内，溶菌酶存在于中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞内；也存在于黏膜分泌液中，成为体表防御因素之一。从蛋清中提取制得。1.原料处理 新鲜或冰冻蛋清（或蛋壳水）70kg，用试纸测其pH值，应在8.0左右，经解冻后通过铅筛，除去蛋清中的脐带、蛋壳碎片及其他杂质。2.吸附 用冰水冷却并搅拌蛋清，使温度降到5℃，缓缓加入724树脂10kg，搅拌，使树脂完全悬浮在蛋清中。保持温度0-10℃，再继续搅拌5h。将蛋清移入冷库，在0-10℃静置过液。3.洗涤、洗脱 隔天把上层蛋清清液倾出，下层用清水洗去附着的蛋白质，先后共洗四次。最后将树脂抽滤去水分，用24kg0.15M磷酸缓冲液（pH6.5）分三次加入树脂搅拌，每次搅拌15min后抽滤去水分。然后用10%硫酸铵18kg，分4次洗脱溶菌酶。合并洗脱液，加入32%（重量/体积）固体硫酸铵使含量达40%，析出白色沉淀。在冷处放置过夜，过滤出沉淀。4.透析 将沉淀溶解于1.5L蒸馏水中，在冷库内透析24-36h，除去大部分硫酸铵。5.盐析 透析完毕，将溶液用滤纸过滤，得澄清透析液。用滴管慢慢加入氢氧化钠溶液，使pH上升到8.5-9.0，如有白色沉淀，应即离心除去。然后在搅拌下加入3N盐酸，使溶液pH为3.5。按体积缓缓加入5%固体氯化钠，生成白色沉淀。在0-10℃冷库放置48h，抽滤得到溶菌酶沉淀。6.干燥沉淀内加入10倍量0℃无水丙酮，搅拌使颗粒松细，在冷处静置数小时，滤去丙酮。沉淀用五氧化二磷真空干燥，即得口服或外用溶菌酶粉剂原料。如不用丙酮脱水，可将溶菌酶透析液冷冻干燥可得不含氯化钠的溶菌酶成品。按蛋清重量计，收率0.1%。原料处理取新鲜或冰冻蛋清70kg，使pH在8左右，解冻过筛，除去蛋清中的脐带、蛋壳碎片及其他杂质。使温度降到5⁰左右（不得超过10⁰），边搅拌加加入724树脂10kg（湿重），待树脂全部悬浮在蛋清中，保持在0～5⁰，搅拌吸附5h，再将蛋清移入冷库0～5⁰，静置过夜。
蛋清^{724树脂；30C}→_吸附树脂吸附物
去杂蛋白、洗脱、沉淀把上层清液倾出，用清水洗去树脂表面附着的蛋白质，反复慢慢清洗4次，以防止树指流失。将树脂抽滤除去水分。分3次将24L、pH6.5的磷酸（0.15mol/L）缓冲溶液加在树脂中，每次加完后搅拌约15min，搅拌后减压抽滤除去水分。再将18L硫酸铵（100g/L即10%），分4次洗脱溶菌酶，每次加完后搅拌0.5h，过滤抽干。合并洗脱液，在每升洗脱液中加入320g固体硫酸铵，使含量达到400g/L(40%)，此时有白色沉淀产生，冷处静置过夜，次日虹吸上清液，沉淀离心分离，得粗品。
树脂吸附物^{H₂O；磷酸缓冲液}→_去杂蛋白吸附物^{(NH₄)^2^）SO₄}→洗脱液^{(NH₄)₂SO₄}→_沉淀粗品
透析将粗品加入1.5kg蒸馏水，使之完全溶解，将入透析袋，冷库中透析24～36h，除去大部分硫酸铵，得透析液。
粗品^{蒸馏水；溶解}→_透析透析液
盐析将澄清透析液，在不断搅拌下慢慢滴加氢氧化钠（1mol/L）,中和掉过量酸，使pH达8.5～9时，如有沉淀生成，应立即离心除去、然后在不断搅拌下加盐酸（3mol/L），使溶液pH达到3.5，按体积每100ml酸性透析液缓缓加入固体氯化钠5g，即有白色沉淀析出，在0～5⁰冷库放置2d，离心或过滤得溶菌酶沉淀 。
透析液^…→_NaCl盐析湿溶菌酶
干燥在不断搅拌，按照溶菌酶沉淀的质量加入10倍于该量的冷却至0⁰C的无水丙酮，待颗粒权细，在冷处放置数小时，滤去丙酮，沉淀用真空干燥，直到无丙酮臭味为止，即得口服或外用溶菌酶原料。
湿溶菌酶^丙酮；00C→_干燥溶菌酶
制剂取干燥粉碎砂糖粉，每千克该糖粉中加入50g的滑石粉（即得5%），通过129目筛，加淀粉浆（50g/L 即5%）适量，在混合机内搅拌均匀，制成软材，过12目筛，70⁰C烘干，用14目筛整颗，水分应以控制在2%～4%左右。加入一定量溶菌酶粉混合，加1%硬脂酸酶，过16目筛2次，压片，即得溶菌酶口含片，每片含溶菌酶20mg。
溶菌酶^压片→_制剂口含片