概述
3,3',5,5'-四甲基联苯胺盐酸盐是3,3',5,5'-四甲基联苯胺 (TMB)的衍生盐，二氨基联苯的非制癌替代物。分子式为C16H22Cl2N2，分子量313.2653，米白色或微粉红色粉末。
合成
以2,6-二甲基苯胺为原料，首先通过高锰酸钾的氧化得到2,2',6,6'-四甲基偶氮苯，然后再用锌粉和浓盐酸一步法直接把2,2',6,6'-四甲基偶氮苯还原，重排，并经处理得到3,3',5,5'-四甲基联苯胺及其盐酸盐。本合成方法所用原料价廉易得，操作过程简单方便，反应条件温和，收率较高[1]。
应用
3,3',5,5'-四甲基联苯胺盐酸盐用于酶免ELISA反应，是一种新型安全的色原试剂，应用于临床化验、法医检验、刑事侦查及环境监测等领域。尤其在临床生化检验方面，3,3',5,5'-四甲基联苯胺盐酸盐用于过氧化物酶检测、比色分析[2-4]。该底物能产生一种可溶性淡黄色的末端产物，能在370或620-650nm处光度法读取，TMB反应可用2M H2SO4终止（结果为黄色），并能在450nm处读取。
1.基于纳米铂模拟过氧化物酶的汞离子检测。利用纳米铂与汞离子的特异性相互作用后其模拟过氧化物酶活性的抑制变化，通过纳米铂催化过氧化氢氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺盐酸盐显色，提供了一种快速，简便，超灵敏的汞离子检测新方法。该检测新方法所用纳米铂制备简便易得，可以实现对汞离子可视化便捷分析，具有操作简便，检测时间短，灵敏度高，特异性强等优点，易于推广使用[5]。
2.基于汞离子增敏锇纳米粒子氧化酶活性的肝素酶检测。肝素修饰锇纳米粒子加入汞离子之后，肝素修饰锇纳米粒子的氧化酶活性被增敏和激活，能够催化氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺盐酸盐生成蓝色物质。而肝素酶能够降解肝素，加入肝素酶，汞离子增敏肝素锇纳米粒子催化氧化3,3',5,5'-四甲基联苯胺盐酸盐的蓝色物质由深蓝变为浅蓝，紫外600 nm处的吸收值降低，建立显色体系实现对肝素酶的检测。该检测方法可以实现血清样品中肝素酶的便捷分析，具有操作简便，检测时间短，灵敏度高，特异性强等优点，易于推广使用[6]。
3.应用于信号传感系统研究。采用原位还原法将铂纳米颗粒负载到聚乙二醇修饰的氧化石墨烯表面，此纳米杂化材料在水溶液中表现出较好的类过氧化物酶活性，能快速催化H2O2产生·OH，使显色底物3,3',5,5'-四甲基联苯胺盐酸盐发生明显的颜色变化，在652 nm处出现吸收峰[7]。
参考文献
[1]余书强.一种3,3',5,5'-四甲基联苯胺及其盐酸盐的合成方法.CN201810765630.6.
[2]李庆春,秦枫,王秀伟.一种酶联免疫显色底物及其制备方法.2016.
[3]骆鹏杰,王华丽,陈霞,等.TMB双组份显色液及具有其的试剂盒:201710896673[P].
[4]陈伟,张灵娜,林逢林,等.多孔铂-氧化石墨烯复合纳米材料模拟过氧化物酶:CN201310557888.4[P].CN103551143A.
[5]陈伟,何少斌,吴钢伟,等.基于纳米铂模拟过氧化物酶的汞离子检测方法及其试剂盒:CN201410487581.6[P].CN104267026A.
[6]陈伟,何少斌,邓豪华,等.基于汞离子增敏锇纳米粒子氧化酶活性的肝素酶检测方法:CN201910946723.3[P].CN112697720A.
[7]王莹莎程姗姗张守婷卢小泉.基于氧化石墨烯/聚乙二醇/铂纳米杂化材料构建Hg2+的信号传感系统[J].分析化学, 2021, 049(006):1035-1043.