盐酸普鲁卡因已有近百年历史，是国内外广泛应用的临床药物之一，被收入中、美、英、日、德、意等许多国家药典。它性质稳定，局麻效果好，毒性小，临床常用于局部浸润麻醉、阻滞麻醉、硬膜外麻醉和腰椎麻醉等。
鉴别
（1）水解反应：水解反应基于分子结构中的酯键可在碱性条件下水解产生二乙氨基乙醇和对氨基苯甲酸，利用这两个水解产物对盐酸普鲁卡因进行鉴别。
方法：取供试品约 0.1g，加水 2ml 溶解后，加 10％氢氧化钠溶液 1ml，即生成白色沉淀；加热，变成油状物，继续加热，发生的蒸气使润湿的红色石蕊试纸变为蓝色；加热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀；沉淀可溶于过量的盐酸。
（2）芳香第一胺反应：此反应又称重氮化－偶合反应，用于鉴别芳香第一胺（即芳伯氨）。盐酸普鲁卡因具有芳伯氨基，在盐酸介质中与亚硝酸钠作用，生成重氮盐，重氮化盐进一步与β－萘酚偶合，生成橙色或猩红色的偶氮合物沉淀。
（3）红外光谱法：盐酸普鲁卡因分子结构中存在芳伯氨基、苯环、酯基等基团，其红外光谱中显示相应的吸收峰，《中国药典》规定，本品的红外吸收图谱应与对照的图谱一致。
检查
盐酸普鲁卡因的杂质检查项目有：酸度、溶液的澄清度、干燥失重、炽灼残渣、铁盐及重金属和对氨基苯甲酸，在盐酸普鲁卡因的生产中和贮藏中都有可能引入对氨基苯甲酸。采用反相液相色谱检查。
含量测定
（1）盐酸普鲁卡因分子结构中含有芳伯胺，用亚硝酸钠滴定液在盐酸溶液中与芳伯氨基定量发生重氮化反应，生成重氮盐以测定药物含量的方法。
方法：取本品约 0.6g，精密称定，照永停滴定法，在 15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol／L）滴定。每 1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol／L）相当于 27.28mg 的盐酸普鲁卡因（C13H20N2O2·HCl）。滴定原理同芳香第一胺的鉴别项下。由重氮化反应可知，1mol 的亚硝酸钠相当于 1mol 的盐酸普鲁卡因，盐酸普鲁卡因的分子量为 272.77，所以滴定度 T＝0.1×272.77＝27.28（mg）
（2）指示终点的方法：电位法、永停滴定法、内指示剂法和外指示剂法。《中国药典》采用永停滴定法。
（3）注意：由于重氮化反应速度较慢，若在滴定时向供试溶液中加入适量溴化钾，可加速重氮化反应速度。